CRISPR-Cas9 sgRNA文庫合成

研究基因在代謝通路或某些特定疾病發生過程中的功能,對于疾病機理研究及藥物研發具有非常重要的意義。新一代基因編輯技術CRISPR-Cas9以其操作簡單和通用的獨特優勢,成為開展正向遺傳學篩選實驗強有力的工具。利用CRISPR-Cas9技術建立可能與某類功能相關的突變體庫,通過功能性篩選和富集、PCR擴增及深度測序分析,確認與這類功能相關的基因。

泓迅科技利用獨創的“GPS”(Genotype,Phenotype,Synotype)平臺,提供基于CRISPR-Cas9 sgRNA文庫的一站式基因功能篩選服務。我們專利的Syno?3.0 合成技術平臺,可以快速高效地實現sgRNA文庫構建,并包裝成慢病毒混合文庫后轉染細胞。結合高通量/高內涵篩選平臺,利用控制細胞存活、結合免疫染色、流式細胞術等手段篩選得到所需細胞,最終通過測序等方法推斷出發揮作用的靶基因。

CRISPR-Cas9 sgRNA文庫合成技術路線圖

CRISPR-Cas9 sgRNA文庫合成技術路線圖

CRISPR-Cas9 基因編輯平臺一體化服務流程

crispr-cas9 基因編輯平臺一體化服務流程

泓迅sgRNA文庫構建服務優勢

  1. 泓迅科技專利的Syno?3.0DNA合成技術平臺,使sgRNA文庫合成的價格降低
  2. 采用慢病毒轉染系統,有效提高sgRNA轉染效率
  3. 豐富的篩選平臺:控制細胞存活、結合免疫染色、流式細胞術等多種篩選方法
  4. 為客戶提供從CRISPR-Cas9 sgRNA文庫設計、合成、慢病毒包裝到篩選的一站式解決方案。

CRISPR-Cas9 sgRNA文庫構建與篩選應用實例

【經典案例】已知藥物功能篩選其耐藥靶點的方案:

Genome-Scale CRISPR-Cas9 Knockout Screening in Human Cells Ophir Shalem et al. Science 343, 84 (2014)

  1. 明確該藥物功能及其致死工作濃度。
  2. 構建 CRISPR-Cas9 gRNA慢病毒文庫并侵染細胞,構建整合CRISPR-Cas9 gRNA的細胞混合克隆。
  3. 篩選:高濃度藥物短期內持續作用細胞混合克隆,成活的細胞即為產生耐藥性的細胞,其耐藥性的產生原因是 CRISPR-Cas9 gRNA導致的基因改變。
  4. 存活的細胞通過二代測序,比對得到gRNA 信息,從而推斷出起作用的基因靶點。
gecko-library sgrna-frequency

CRISPR-Cas9 sgRNA文庫構建與篩選服務內容

泓迅CRISPR-Cas9 sgRNA文庫及篩選服務包括CRISPR-Cas9 sgRNA文庫構建、慢病毒包裝、高通量/高內涵篩選等,利用我們先進的合成及篩選技術平臺,為客戶提供基于CRISPR-Cas9技術的基因功能篩選全套解決方案。

 

服務項目 內容 周期 價格 交付形式
人源 CRISPR-Cas9 sgRNA 慢病毒文庫 約 21,000 個基因,每個基因對應 6 條 sgRNA 咨詢 咨詢 慢病毒毒液
-80 度儲存
CRISPR-Cas9 sgRNA文庫定制 可定制針對特定基因分類的gRNA文庫,包括全基因組文庫、 lncRNA 文庫、細胞凋亡、細胞增殖、信號通路、離子通道、核受體相關等文庫 咨詢 咨詢 sgRNA凍干質粒
測序報告
sgRNA文庫慢病毒包裝 根據客戶要求設計若干個基因的sgRNA,每個基因6條sgRNA,混合包裝慢病毒。 咨詢 咨詢 慢病毒毒液
sgRNA文庫篩選 利用控制細胞存活,結合免疫染色、流式細胞術流式等手段得到的篩選后的細胞 咨詢 咨詢 篩選報告及原始測序結果

 

CRISPR-Cas9 sgRNA文庫合成訂購與咨詢

您可以通過以下任意方式下單或咨詢,工作時間我們保證在1小時內給您反饋:

  1. Email:請將您的需求發送到[email protected]
  2. 電話咨詢:您可以直接撥打免費熱線4000-973-630轉803聯系我們經驗豐富的工程師
  3. QQ咨詢:任何技術問題均可與我們在線互動,泓迅科技官方企業QQ:4000-973-630